体视荧光显微镜技术参数
一、光学系统与变倍
• 平行光路（CMO）或 Greenough 结构，前者立体感与共焦性更好，后者光通量高
• 连续变倍比 6.7:1 / 10:1 / 16:1，变倍比越大可调范围越宽
• 总放大倍数约 8X–80X（配 10X 目镜），加 2X 物镜可到 160X
• 变倍旋钮带倍率刻度，便于记录与复现
• 齐焦设计：变倍过程中无需重新对焦
二、荧光光路（核心项）
• 荧光模块独立于明场光路，通常装在机头上方或侧面
• 荧光通道 ≥ 4 组：紫外（U）、蓝（B）、绿（G）、紫（V）
• 常用组合：DAPI（U）、GFP/FITC（B）、TRITC/Texas Red（G）
• 荧光通道切换为转盘或推拉式，切换时不移动样品
• 荧光与明场可同时叠加观察（部分机型支持双光路）
三、滤光片组与光源
• 滤光片为激发滤片 + 二向色镜 + 发射滤片三件套
• 激发/发射波长须与荧光蛋白或染料匹配，选错等于看不到
• 光源：LED 荧光光源（寿命长、即开即用、可调光）或汞灯（HBO 100 W，光强高但需预热、寿命约 200–300 h）
• LED 各通道独立开关，减少样品淬灭
• 光源功率与样品亮度需匹配，过强会快速漂白
四、工作距离与数值孔径
• 工作距离 100–115 mm，最大可到 180 mm（长工作距离机型）
• 数值孔径 0.3–0.5，NA 越大分辨率越高但景深越浅
• 工作距离大便于镊子、解剖器械操作，这是体视镜的核心优势
• 加装荧光后工作距离基本不变，但物镜前段需留出避让空间
五、支架与载物台
• 支架形式：立柱式、摇臂式、万向支架、透射底座
• 载物台：黑白板（观察不透明样品）、毛玻璃板（透射光）、附加移动台
• 移动台行程 ≥ 75 × 50 mm，带刻度便于定位
• 防振要求低于正置/倒置，但荧光高倍观察仍建议稳固台面
六、照明配置
• 反射照明：LED 环形光、双支光纤、同轴光（消除阴影）
• 透射照明：底座内置 LED 或外置光源，适合透明与半透明样品
• 环形光可分段控制（四分区），突出表面纹理
• 荧光观察时须关闭明场光源，避免背景光污染
七、成像与软件
• 三目头，C 口相机接口，目视与拍照可切换
• 相机像素 500 万–2000 万，荧光成像建议选高灵敏传感器
• 软件支持多通道合成、荧光强度测量、景深扩展（EDF）
• 可做荧光与明场的叠加图，用于定位信号位置
八、使用环境
• 电源 AC 220 V ± 10%，50 Hz
• 工作温度 15–30 ℃
• 相对湿度 ≤ 70%
• 暗室或遮光环境观察荧光效果最佳
• 避免强振动与阳光直射
九、采购时最容易出问题的三处
• 荧光通道只配 2 组，做 GFP + TRITC 双标后无法再加 DAPI，三标实验做不了
• 配汞灯但没配 LED，灯泡寿命 200–300 h，一年换灯成本与停机时间都高
• 工作距离选了短焦机型，装荧光模块后器械进不去，体视镜最核心的优势丢了
